Clorhidrato de guanidina: replegamiento de proteínas, proteína solubilizante

        En el proceso de renaturalización de proteínas, primero se debe disolver la proteína del cuerpo de inclusión. La proteína de cuerpos de inclusión se refiere a la agregación de proteínas expresadas por bacterias en las células para formar partículas sólidas inactivas, que son amorfas e insolubles en agua, y solo se disuelven en desnaturalizantes como urea yclorhidrato de guanidina.

Posteriormente, el agente desnaturalizante se elimina lentamente para restaurar la proteína diana del estado desnaturalizado completamente estirado a la estructura plegada normal, mientras que el agente reductor se elimina para permitir la formación normal de enlaces disulfuro. Generalmente, el proceso de renaturalización declorhidrato de guanidinacomienza en 4M y termina en 1.5M. Hay varios métodos diferentes:

Dilución y replegamiento: agregue directamente agua o tampón para diluir la solución y déjela durante la noche para que precipite la proteína. La desventaja es que el volumen aumenta mucho, la velocidad de dilución del desnaturalizante es demasiado rápida y es difícil de controlar; replegamiento por diálisis o ultrafiltración: ambos desnaturalizantes Las sustancias de pequeño peso molecular pueden penetrar gradualmente en la membrana porosa durante la diálisis o la ultrafiltración, de modo que la concentración de desnaturalizante de la solución de proteína desnaturalizada se reduce gradualmente y finalmente se elimina, de modo que la proteína desnaturalizada se pliega y se pliega. La ventaja es que no aumenta el volumen. La velocidad de eliminación del desnaturalizante se controla reduciendo gradualmente la concentración del permeado externo, pero el proceso es lento y requiere mucho tiempo; Renaturalización en columna: La renaturalización se logra en el proceso cromatográfico, que ha sido estudiado y exitosamente recientemente. Un método de replegamiento utilizado en la producción. La ventaja es que la capacidad de adsorción de la fijación cromatográfica es relativamente baja en comparación con la proteína desnaturalizada, lo que puede mejorar la calidad del replegamiento y el rendimiento de actividad; al mismo tiempo, también puede separar la proteína diana y la proteína de impureza para lograr el propósito de purificación; y es conveniente recuperar el desnaturalizante.

La proteína es una macromolécula biológica relacionada con la vida, una sustancia indispensable para mantener el progreso normal de la vida, y también es el código de herencia de la vida de segunda generación. Varias investigaciones sobre proteínas también son temas de mayor interés para las personas, y la investigación sobre su estructura también es muy importante para el avance de la medicina. La desnaturalización o renaturalización de las proteínas es uno de los temas centrales en la investigación de las ciencias de la vida. Entre ellos, el desnaturalizanteclorhidrato de guanidinano solo puede desnaturalizar la proteína, facilitar el estudio de su estructura, sino también disolver la proteína del cuerpo de inclusión durante el proceso de renaturalización. Jugó un papel fundamental en la investigación.